Aplicación del reactivo de un tubo de RT en la detección múltiple del tracto respiratorio
Prefacio
Después del COVID-19, la conciencia de las personas sobre la prevención y el control de las enfermedades infecciosas respiratorias ha aumentado gradualmente. La demanda de detección múltiple de patógenos respiratorios comunes como la influenza A, la influenza B y el virus respiratorio sincitial está aumentando en el mercado. La detección a gran escala de enfermedades respiratorias tiene las características de una gran cantidad de detección y muchos tipos de patógenos. Sin embargo, la preparación repetida del sistema de reacción durante el proceso de detección es propensa a adiciones incorrectas o faltantes, lo que reduce en gran medida la eficiencia. Para resolver el problema de los engorrosos experimentos de PCR en la detección múltiple del tracto respiratorio y su detección a gran escala, y para satisfacer las necesidades de los clientes en cuanto a comodidad y eficiencia, Biori lanzó Neoscript Fast RT Premix OT-UNG (Probe qRT- PCR),
Productos Destacados
1. Alta sensibilidad: adecuado para la amplificación de alta sensibilidad de plantillas de ARN de baja concentración.
2. Alta estabilidad: los cebadores y sondas de premezcla se pueden agregar por adelantado y el almacenamiento estable a largo plazo a baja temperatura.
3. Compatible con procedimientos de amplificación rápida: se utilizan transcriptasa inversa de alta temperatura y polimerasa de ADN de amplificación rápida, que tienen una mayor eficiencia de transcripción inversa y PCRamplificación, y puede completar las reacciones de PCR en 20-40 minutos.
Rendimiento del producto
Prueba de comparación de productos similares
(1)Procedimiento de amplificación normal
Condiciones experimentales:
Código | M5274 | Sistema | Sistema de detección cuádruple de virus respiratorios |
Plantilla | Control de calidad de virus respiratorios plantilla de purificación de muestras | Concentración de plantilla | 0.25,2,5 copias/metroL |
programa de ciclismo | 50℃15 minutos;95℃1 minuto;50 ciclos(95℃15s,56℃45s) |
Características | Concentración de plantilla(copias/metroL) | Valor medio de Ct | |||
familia | VIC | ROX | Cy5 | ||
proveedor n | 0.25 | 36.50 | 24.97 | 36.93 | 35.95 |
2.50 | 32.83 | 21.21 | 33.02 | 32.33 | |
Biori M5274 | 0.25 | 36.55 | 23.80 | 36.74 | 35.39 |
2.50 | 33.01 | 20.50 | 33.27 | 31.81 |
(2) Procedimiento de amplificación rápida
Condiciones experimentales:
Código | M5274 | Sistema | Sistema de detección triple COVID-19 |
Plantilla | COVID-19plantilla de purificación de muestras de control de calidad | Concentración de plantilla | 1.25,12,5 copias/metroL |
programa de ciclismo | 50℃3 minutos;95℃30s;45 ciclos(95℃3s,60℃15s) |
Características | Concentración de plantilla(copias/metroL) | Valor medio de Ct | ||
familia | VIC | ROX | ||
proveedor n | 1.25 | 35.22 | 35.33 | 34.33 |
12.5 | 32.05 | 31.73 | 31.05 | |
Biori M5274 | 1.25 | 33.86 | 33.18 | 33.53 |
12.5 | 30.25 | 30.03 | 30.53 |
Prueba de Estabilidad Acelerada
Condiciones experimentales:
Código | M5274 | Sistema | Sistema de detección cuádruple de virus respiratorios |
Plantilla | Control de calidad de virus respiratorios plantilla de purificación de muestras | Concentración de plantilla | 0.25,2,5 copias/metroL |
programa de ciclismo | 50℃15 minutos;95℃1 minuto;50 ciclos(95℃15s,56℃45s) |
Método de prueba: coloque el reactivo de premezcla (5x) sin cebador y sonda a 37 °C durante 14 días y use el grupo experimental almacenado a -20 °C como control para pruebas comparativas. Los resultados muestran que M5274 puede mantener un rendimiento estable después de acelerarse a 37 °C durante 14 días.
Prueba acelerada de un tubo con cebado y sonda(Biorí)
Condiciones experimentales:
Código | M5274 | Sistema | Sistema de detección cuádruple de virus respiratorios |
Plantilla | Control de calidad de virus respiratorios plantilla de purificación de muestras | Concentración de plantilla | 0.25,2,5 copias/metroL |
programa de ciclismo | 50℃15 minutos;95℃1 minuto;50 ciclos(95℃15s,56℃45s) |
Método de prueba: Tampón de mezcla, enzima,cebador y sonda como solución de trabajo, y colóquelo a 37°C durante 3 días para acelerar. La solución de trabajo preparada instantáneamente del mismo sistema se usó como control para llevar a cabo una prueba comparativa. Los resultados muestran que M5274 puede permanecer estable en el estado de cebador y sonda, y solo necesita agregar plantilla en experimentos posteriores para lograr una amplificación de alta eficiencia, y los reactivos son más convenientes de usar.
Resultados de experimentos acelerados de un reactivo de un tubo (con cebadores y sondas):
Prueba de aceleración de un tubo con cebado y sonda(proveedor n):
Prueba de estabilidad de congelación y descongelación
Condiciones experimentales:
Código | M5274 | Sistema | Sistema de detección cuádruple de virus respiratorios |
Plantilla | Control de calidad de virus respiratorios plantilla de purificación de muestras | Concentración de plantilla | 0.25,2,5 copias/metroL |
programa de ciclismo | 50℃15 minutos;95℃1 minuto;50 ciclos(95℃15s,56℃45s) |
Método de prueba: Congele y descongele el reactivo de premezcla (5x) sin cebadores ni sondas 5, 10, 15 y 20 veces, y use el grupo experimental con 0 tiempos de congelación y descongelación como control para las pruebas comparativas. Los resultados muestran que M5274 puede mantener un rendimiento estable después de 20 ciclos de congelación y descongelación.
Aplicaciones
1. Detección de virus de ARN humanos y relacionados con animales
2. Detección de alta sensibilidad de nueva corona, virus de la influenza, inspección respiratoria de múltiples articulaciones, etc.
3. Solicitud POCT
Enlaces de productos
Nombre del producto | Código | Características |
Neoscript Fast RT Premix OT-UNG (Sonda qRT-PCR) | M5274 | Reactivo de un tubo RT |
Robustart Premix OT-UNG (Sonda qPCR) | M2211 | reactivo de un tubo de ADN |